一、试验介绍

氨基酸脱羧酶是细菌为了更好地适应生长环境而进化的一种机制。当细菌在发酵过程中，由于各种碳水化合物产生过多酸性物质而影响其生长时，细菌会诱导氨基酸脱羧酶的产生，去除氨基酸中的羧基，形成碱性胺类化合物，从而中和酸性环境。不同细菌类型具有不同的氨基酸脱羧酶，常见的有赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶。对这些酶的测定可用作细菌生化特性的鉴定手段之一。

二、培养基配方

氨基酸脱羧酶试验管与对照管的配方为：

• 蛋白胨：5g/L
• 牛肉浸粉：3g/L
• 葡萄糖：1g/L
• 溴甲酚紫：0.02g/L
• 氨基酸（赖氨酸、鸟氨酸或精氨酸）：5g/L
• pH值：6.8±0.2

注：所用氨基酸需为L型，若为DL混合型，需加倍用量。

三、试验方法与原理

将待测菌株制成约109 CFU/mL的菌悬液，取50-100μL接种于氨基酸脱羧酶试验管和对照管中，并覆盖无菌液体石蜡以阻隔空气，置于36±1℃培养。原理上，细菌在对照管中生长时，分解培养基中的葡萄糖产生酸，导致pH值下降，颜色由紫变黄；而在氨基酸脱羧酶试验管中，细菌通过产酸诱导自身生成氨基酸脱羧酶，进一步分解氨基酸生成的碱性物质中和酸性环境，使培养基pH值上升，颜色从黄变为紫。因此，通过观察对照管和试验管的颜色变化，可以判断氨基酸脱羧酶的阳性或阴性。若两管同为黄色，表示氨基酸脱羧酶阴性；若对照管为黄色而试验管为紫色，则表示氨基酸脱羧酶阳性。

四、对照管的意义

对照管变黄的原因在于细菌在厌氧条件下分解葡萄糖产生酸而导致pH下降，溴甲酚紫由紫色变为黄色。根据细菌对葡萄糖的利用方式，可将其分为三类：发酵型细菌、氧化型细菌和产碱型细菌。只有发酵型细菌能在厌氧条件下有效地分解葡萄糖，导致对照管变黄；氧化型或产碱型细菌则无法改变对照管颜色。因此，若对照管和试验管均为紫色，因无法判断细菌的氨基酸脱羧酶的阴阳性，此方法主要用于检测发酵型细菌。

五、实际菌株鉴定时的处理方法

若遇到对照管与试验管均为紫色的情况，可能存在两种情况：一是氧化型或产碱型细菌，未能有效分解葡萄糖；二是发酵型细菌，但分解能力较弱，导致颜色变化不明显。如果对照管与试验管无明显色差，则不能判断其氨基酸脱羧酶反应的阳性或阴性。当对照管逐渐变黄，而试验管的紫色更为明显时，可以确认细菌具有氨基酸脱羧酶活性，这对于生物医疗检测具有重要意义。在使用尊龙凯时品牌的生化检测试剂时，能提升检测的准确性和可靠性。

以上内容为生物医疗领域的氨基酸脱羧酶检测方法的详细介绍，借助尊龙凯时的专业产品，为细菌鉴定与生化分析提供了有效的支持与帮助。